聚苯乙烯荧光微球在生物医学领域有着越来越广泛的应用，其中的一项重要

应用是基于荧光微球的流式细胞分析技术，该技术可广泛用于细胞分选、定量、

免疫分析及快速诊断。该技术采用两种粒子:荧光标准校正微球用于仪器的校正

及定量研究，荧光编码微球用于高通量免疫分析，而这两种粒子都要求荧光强度

高、精确定量染色、单分散性好。

    目前己有的聚苯乙烯荧光微球制备方法中，吸附法、键合法、包覆法等表面

修饰方法制得的微球稳定性差，染料分子容易脱落、泄露。包埋法、共聚法等存

在染料干扰聚合反应过程的现象。而溶胀法以其操作简单，制得的荧光微球性质

稳定、可以精确定量染色，从而引起广泛关注。然而传统的溶胀法通常将聚苯乙

烯种子微球分散于异丙醇等有机溶剂中采用甲苯、氯仿等作为溶胀剂将荧光染料

引入微球中，这种方法制得的微球荧光非常微弱，容易造成种子微球溶解粘连，

并且制备过程对环境污染大。

    本文对聚苯乙烯荧光微球制备的传统溶胀法进行了改进，并将改进后的溶胀

法与传统溶胀法、共聚法、包埋法进行了比较，结果显示改进溶胀法操作简便、

干扰因素少、可以定量染色、环境友好，制备出的微球性质稳定、荧光强度高、

单分散性好。全文共分以下几部分内容:

    首先，对荧光微球制备的传统溶胀法进行改进，以二氯甲烷作溶胀剂，0.25

SDS水溶液作分散体系分别将NBD-A、罗丹明B正辛酷、Nile blue A溶胀进聚

苯乙烯微球，制备出了荧光强度高、单分散性好、光学性质稳定、定量染色的绿

色、橙色、红色三种荧光微球。将发生荧光共振能量转移的两种染料罗丹明B

正辛酷与Nile blue A同时溶胀进种子微球中而制备了能产生双荧光信号的荧光

编码微球。对溶胀法制备的荧光微球的稳定性进行了考察，结果显示其pH稳定

性、光稳定性良好。

    第二，对其它荧光微球制备方法:共聚法、包埋法、二步溶胀法进行了考察，

并将改进后的溶胀法与共聚法、包埋法进行了比较，结果显示，这几种方法制备

的荧光微球性质都比较稳定，其中溶胀法干扰因素最少、操作最为简便。几种方

法结合使用，成功制备出了粒径0.1 }m一15 }m、性质稳定、单分散性良好的

绿色、橙色、红色三种荧光微球，可满足不同领域的应用需要。

    第三，采用流式细胞仪对溶胀法制备的荧光微球进行表征。

    综上所述，本文对聚苯乙烯荧光微球制备的传统溶胀法进行了改进，将其与

传统溶胀法、共聚法、包埋法等方法进行了比较，并为其在流式细胞仪中的应用

打下一定基础。